Метод серийных разведений

Метод серийных разведений

Для определения содержания антибиотика в жидкостях организма (кровь, экссудаты полостей, ликвор и др.) можно также использовать способ поочередных разведений в водянистой среде.

Питательной средой при всем этом служит среда Гисса с глюкозой и реактивом Андреде (рН 7,2) либо оксибензол - сывороточная среда (2 мл

10% раствора глюкозы, 2 мл сыворотки крови человека, 6 мл дистиллированной воды Метод серийных разведений и 0,25 мл насыщенного раствора фенолрота).

Среды заражают стандартизированной взвесью определенного для каждого антибиотика тест-микроба из расчета 1000-10000 микробных клеток на 1 мл среды. Зараженную среду разливают по 0,2 либо 0,5 мл в стерильные пробирки. Для каждого эталона готовят два ряда по 10 пробирок в каждом. 1-ый ряд служит для разведения раствора эталона антибиотика (эталон разводят Метод серийных разведений до подходящей концентрации сывороткой человека либо здорового животного), 2-ой – для разведения испытуемого материала (к примеру, сыворотки). Разведения (двукратные, поочередные) испытуемого раствора и стандартного эталона создают в объеме 0,2 либо 0,5 мл засеянной среды. Контролями опыта служат незаражённая (контроль прозрачности и стерильности) и заражённая подходящим тест-микробом (контроль роста микроорганизма) среды. Результаты учитывают Метод серийных разведений после 16-18 ч инкубации при 370С по изменению цвета (среда Гисса становится розовой, оксибензол - сывороточная - из красноватой при рН 7,2 становится желтоватой за счет сбраживания возрастающими микробами глюкозы и конфигурации рН) и помутнению среды. Для того, чтоб установить концентрацию лекарств в исследуемой сыворотке, множат наибольшее разведение сыворотки, задерживающее рост тест Метод серийных разведений-микроба (разведение в последней пробирке с прозрачной, не изменившей цвета средой), на меньшую концентрацию эталона антибиотика в пробирке с отсутствием роста. Приобретенная величина соответствует содержанию антибиотика в 1 мл исследуемой сыворотки. К примеру, концентрация пенициллина в сыворотке крови определяют по последующей таблице 5.

Таблица 5. - Определение содержания пенициллина в сыворотке

Разведение сыворотки Рост тест Метод серийных разведений-микроба 1:2 - 1:4 - 1:8 - 1:16 + 1:32 + 1:64 +
Концентрация эталона пенициллина в среде в ЕД/мл Рост тест-микроба 0,2 - 0,1 - 0,05 - 0,025 - 0,125 + 0,0063 +
Примечание: (+) – рост микроорганизма; (-) – отсутствие микроорганизма

В приведённом примере раствор эталона пенициллина задерживает рост тест-микроба в концентрации 0,025 ЕД/мл, а испытуемая сыворотка – в разведении 1:8. Содержание пенициллина в неразведённой сыворотке соответствует 0,025 x 8=0,2 ЕД/мл.

Не Метод серийных разведений считая определения концентрации лекарств в тканях и жидкостях организма, описанные микробиологические способы употребляют для определения активности образцов на всех стадиях производства лекарств, для определения стабильности лекарств либо препаратов, содержащих лекарства. Хим либо физико-химические способы исследования количественного содержания антибиотика в препарате используют в этом случае, если получаемые результаты совпадают с плодами микробиологической Метод серийных разведений оценки активности.

Очевидно, обозначенные способы определения антибиотикочувствительности микробов должны проводиться в сертифицированных, аттестованных (лучше аккредитованных) микробиологических лабораториях. Но большая часть районных больниц не имеют таких, в связи с чем ВОЗ в порядке исключения допускает возможность использования приблизительных способов оценки антибиотикочувствительности. К примеру, по мазку из исследуемого Метод серийных разведений материала, окрашенного по Граму, определив наличие либо доминирование грамположительных либо грамотрицательных микробов, можно ориентировать клиницистов на выбор стартовой антибиотикотерапии. Допускается также (В.В. Мельникова, 1984) определение антибиотикочувствительности совокупной микрофлоры без выделения незапятнанных культур, что занимает 18-24 часа от момента поступления материала в лабораторию. В следующие деньки при наличии критерий может быть более Метод серийных разведений детализированное исследование незапятнанных культур микробов с корректировкой по мере надобности начатой стартовой бактерицидной терапии.

Обозначенные неординарные приблизительные способы, на наш взор, могут быть подспорьем в выборе стартовой антибиотикотерапии. По последней мере это лучше, чем эмпирическая терапия «с потолка», которая, к огорчению, свойственна не только лишь для районных, да и Метод серийных разведений ряда областных центров.

Таким макаром, определение чувствительности возбудителей заразного процесса к бактерицидным продуктам является главным лабораторным способом, на базе которого осуществляется выбор рационального и действенного продукта для исцеления.


metod-sozdaniya-obfuskatora-s-redaktiruemim-algoritmom-obfuskacii-tezisi-dokladov.html
metod-srednevzveshennoj-stoimosti.html
metod-srednih-velichin-i-variacionnij-analiz.html